Suora RT-qPCR Kit
Kuvaus
Direct RT-qPCR Kit sisältää erikseen pakatun RT-qPCR-puskurin ja erittäin tehokkaan entsyyminsekoitus (Taq、M-MLV、RI), mikä tekee siitä kätevän taustasarjojen ja -järjestelmien luomiseensäätö, yksinkertaisella tarkistuksella.
Tekniset tiedot
500T, 50000T
Sarjan komponentit
Sarjan sisältö (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50 000 T | |
Suora entsyymisekoitus | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
2× suora RT-qPCR-puskuri | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
Ohje | 1 | 1 |
Käyttövaiheet
Ennen reagenssin valmistusta kaikki sarjan reagenssit tulee sulattaa huoneenlämmössä ja sekoittaa varovasti.
A: Valmistella of sapluuna ja reagenssi
1. Valmistele valmistettu RNA-templaatti (suosittelemme Foregene Total RNA Isolation Kit -sarjan sarjan käyttöä RNA-templaatin uuttamiseen ja puhdistamiseen) tai näytteen krakkaustuote (On suositeltavaa käyttää Foregene Lysis -järjestelmää), erityiset alukkeet (10 μM) ja muut asiaankuuluvat tarvikkeet, instrumentti.
2. Laita 2× Direct RT-qPCR -puskuri, RNaasi-vapaa ddH2O ja 20× ROX-referenssiväri (jos se on's tarvitaan) laatikossa jään kanssa, jolloin nämä sulavat luonnollisesti ja sekoitetaan varovasti.
B: Valmistella of RT-qPCR järjestelmä
Pöytä 1 : Valmistella of RT-qPCR sjärjestelmässä
Komponentti | Äänenvoimakkuus | Lopullinen keskittyminen |
2× suora RT-qPCR-puskuri | 10 μl | 1× |
Suora entsyymisekoitus | 1μL | |
Forward Primer (10 μM) | 0,8 µl | 50-900 nM |
Reverse Primer (10 μM) | 0,8 µl | 50-900 nM |
Anturi (4 μM) | 1μL | 200 nM |
Malli (RNA tai lysaatti) | X μL | |
20×ROX-referenssiväri | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
Kokonaistilavuus | 20μL |
C: Aseta the RT-qPCR reaktio ohjelmoida
Pöytä 2 : RT-qPCR reagoidaon ohjelmoida asetusta (varten esimerkki: kaksi-askel menetelmä)
Vaihe | Lämpötila | Aika | Pyörät | Sisältö | |
1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Käänteinen transkriptio |
2 | 95℃ | 1 minuutti | 1 | Esidenaturointi | |
3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturaatio | |
60℃ | 30 s 2* | Hehkutus/pidennys |
Varastointi ja säilyvyys
- Sarja tulee säilyttää -20± 5℃.Voimassaoloaika on 12 kuukautta.
- Vältä toistuvia pakastus-sulatusjaksoja (<5 jaksoa).