Suora RT-qPCR Kit II
Sarjan kuvaus:
◮Suora RT-qPCR Kit, jossa käytetään Foregenen kehittämää Foreasy Reverse Transcriptasea ja Foreasy HS Taq DNA Polymerasea ainutlaatuisella reaktiopuskurilla, tekee tästä sarjasta vahvan vastustuskyvyn ja yhteensopivuuden, ja se voi suoraan testata reaktiota käyttämällä Foregene Lysis -järjestelmää mallina.Tätä sarjaa voidaan käyttää COVID-19-nukleiinihapon havaitsemispakkauksen ja muiden patogeenisten bakteerien nukleiinihapon havaitsemispakkauksen kehittämiseen.
Kuvaus
Direct RT-qPCR Kit sisältää erikseen pakatun RT-qPCR-puskurin, erittäin tehokkaan Foreasy HS Taq DNA Polymeraseja Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),tekee siitä kätevän taustasarjojen luomiseen ja järjestelmän säätöön yksinkertaisella varmennuksella.
Suora RT-qPCR Kit, jossa käytetään Foregenen kehittämää Foreasy Reverse Transcriptasea ja Foreasy HS Taq DNA Polymerasea ainutlaatuisella reaktiopuskurilla, tekee tästä sarjasta vahvan vastustuskyvyn ja yhteensopivuuden, ja se voi suoraan testata reaktiota käyttämällä Foregene Lysis -järjestelmää mallina.Tätä sarjaa voidaan käyttää COVID-19-nukleiinihapon havaitsemispakkauksen ja muiden patogeenisten bakteerien nukleiinihapon havaitsemispakkauksen kehittämiseen.
Tämä sarja voi olla suoraan IVD-tuotteen osa, ja sen käyttö on helppoa ja nopeaa.Se tarvitsee vain helpon todentamisen ilman uutta kehitystä.
Tekniset tiedot
500T, 50000T
Sarjan komponentit
| Sarjan sisältö (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Foreasy Reverse Transkriptaasi (200 U/μL) | 50 µl×1 | 1 ml×5 |
| Foreasy HS Taq DNA -polymeraasi (5 U/μL) | 100 μl×1 | 1 ml×10 |
| 2× suora RT-qPCRPuskuri | 1 ml × 5 | 500 ml x 1 |
| Ohje | 1 | 1 |
Käyttövaiheet
V: Valmistele malli ja reagenssi
1. Valmistele valmistettu RNA-templaatti (suosittelemme Foregene Total RNA Isolation Kit -sarjan sarjan käyttöä RNA-templaatin uuttamiseen ja puhdistamiseen) tai näytteen krakkaustuote (On suositeltavaa käyttää Foregene Lysis -järjestelmää), erityiset alukkeet (10 μM) ja muut asiaankuuluvat tarvikkeet, instrumentti.
2. Laita 2× Direct RT-qPCR -puskuri, RNase-Free ddH2O ja 20× ROX Reference Dye (jos sitä tarvitaan) jään kanssa laatikkoon, jolloin nämä sulavat luonnollisesti ja sekoita varovasti.
B: Valmistele RT-qPCR-järjestelmä
Hanki puolet reaktiojärjestelmän reaktiopuskurin tilavuudesta (jos järjestelmän tilavuus on esimerkiksi 20 μL, sen on saatava 10 μL 2× Direct RT-qPCR -puskuria). vartenvastaava määrä entsyymiä, suosittelemme sitäM-MLV: 10-30 U/20 µl reaktiojärjestelmä,TaqDNA-polymeraasi：1-2 U/20 μL reaktiojärjestelmäTämä on ehdotuksemme, sinun tulee testata ja säätää se), lisää RNA-templaatti, erityiset alukkeet ja koettimet ja lisää RNaasi-Free ddH2O - 20 μl.RT-qPCR-reaktiojärjestelmän spesifiseen valmistukseen voidaan viitata seuraavassa taulukossa 1.
Taulukko 1: RT-qPCR-järjestelmän valmistelu
| Komponentti | Äänenvoimakkuus | Lopullinen keskittyminen |
| 2× suora RT-qPCR-puskuri | 10 μl | 1× |
| Foreasy-käänteiskopioija (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA -polymeraasi | 1-2 U | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 µl | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 µl | 50-900 nM |
| Anturi (4 μM) | 1 μl | 200 nM |
| Malli (RNA tai lysaatti) | X μL | |
| 20× ROX-referenssiväri | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Kokonaistilavuus | 20 μl |
Huomautus: Forward Primer ja Reverse Primer ovat kohdegeenin spesifisiä alukkeita.QPCR:n järjestelmää voitiin säätää käytännön kokeellisten ja PCR-mallien mukaan.Suosittelemme 400 nM useimpien alukkeiden loppupitoisuuteen.Säädä tiettyjen alukkeiden ja koettimien tilavuus valmistetun pitoisuuden ja suositellun lopullisen pitoisuuden mukaan.
1*: Valitse sopiva ROX-referenssivärin lopullinen pitoisuus eri kvantitatiivisten PCR-laitteiden mukaan.Tavallisten kvantitatiivisten PCR-laitteiden optimaalinen ROX-referenssiväripitoisuus on esitetty seuraavassa taulukossa:
| Kvantitatiiviset PCR-laitteet | ROX-referenssivärin lopullinen pitoisuus |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Step One,jne. | 1× (lisää esimerkiksi 1 μl 20 × ROX Reference Dye 20 μl reaktiojärjestelmään) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P ja Mx4000 jne. | 0,5 × (lisää esimerkiksi 0,5 μl 20 × ROX Reference Dye 20 μl reaktiojärjestelmään) |
| Rochen PCR-laite, Bio-Rad PCR-laite, Eppendorfin kvantitatiivinen PCR-laite jne. | Ilman ROX-referenssiväriä |
Varastointi ja säilyvyys
Sarja tulee säilyttää -20 ± 5 ℃:ssa.Se tulee säilyttää välittömästi -20 ℃ termostaattisessa jääkaapissa.Voimassaoloaika on 2 vuotta, jos se varastoidaan sopivassa kunnossa.
