• Facebook
  • linkedin
  • youtube
English
page_banner

Foreasy HS Taq DNA -polymeraasi

Foreasy HS Taq DNA Polymerase Featured Image
  • Foreasy HS Taq DNA -polymeraasi

Sarjan kuvaus:

◮Korkea spesifisyys: Entsyymi, jolla on korkea kuumakäynnistysaktiivisuus.

◮Nopea vahvistus: 10 s/kb.

◮Korkea mallin mukautumiskyky: voidaan käyttää korkean tehokkaaseen vahvistamiseenGCarvojaerilaisia ​​vaikeasti monistettavia DNA-templaatteja.

◮Vahva tarkkuus: Uskollisuus on 6 kertaaof tavallinen Taq-entsyymi.

vieras voima


Tuotetiedot

Tuotetunnisteet

FAQ

Kuvaus

Foreasy HS Taq DNA Polymerase on uusi Taq - entsyymi , joka ekspressoituu Escherichia coli - muokkausbakteereissa geenirekombinaatioteknologialla .Kun entsyymi on käsitelty erityisellä prosessilla, se's-aktiivisuus estyy ennen lämpöaktivaatiota, mikä estää epäspesifistä monistumista, jonka aiheuttaa alukkeiden tai alukedimeerien epäspesifinen pariutuminen matalan lämpötilan olosuhteissa.Tämä tuote soveltuu erittäin spesifiseen PCR Reactiinioni, M usea x PCR, korkea GC-pitoisuus (> 60 %),kanssatoissijainen rakennetai muutavahva taustagenomiicsamplifikaatio ja laajamittainen genomiicsvahvistuksen havaitseminen.Entsyymillä on 5'-→3'-DNA-polymeraasiaktiivisuutta ja 5'-→3'-eksonukleaasiaktiivisuutta, mutta ei 3'-→5'-eksonukleaasiaktiivisuutta.

Sarjan komponentit

Komponentti IM-01021 IM-01022 IM-01023
Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μl)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2× Taq-reaktiopuskuri  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Ominaisuudet ja edut

- Korkea spesifisyys: Entsyymi, jolla on korkea kuumakäynnistysaktiivisuus.

- Nopea vahvistus: 10 s/kb.

- Korkea mallin mukautumiskyky: Voidaan käyttää korkean tehokkaaseen vahvistamiseenGCarvojaerilaisia ​​vaikeasti monistettavia DNA-templaatteja.

- Vahva tarkkuus: Tarkkuus on 6 kertaaof tavallinen Taq-entsyymi.

Kit-sovellus

- Erilaiset PCR/qPCR-järjestelmät ja suora PCR-järjestelmä

- PCR-monistettu DNA-fragmentti

- DNA-merkki

- DNA-sekvensointi

- PCR plus A häntä

Toiminnan määritelmä

1U: Entsyymimäärä, joka tarvitaan sisällyttämään 10 nmolDNAhappoon liukenemattomaan aineeseen käyttämällä aktivoitua lohen siittiöiden DNA:ta templaattina/alukkeena, 74 °C, 30 minuuttia.

Reaktiotila

Lämpötila Reaktioaika Syklin aika
37 °C 5 min 1
94 °C 5 min 1
94 °C 10 sekuntia  40
60 °C 10 sekuntia

Huomautus:Lisää 10 µl:n ja 20 µL:n järjestelmiin yhtä suuri määrä mineraaliöljyä, jos lämpösyklilaitteessa ei ole lämpökantta.

PCR-reaktio-olosuhteet vaihtelevat riippuen templaattien, alukkeiden ja vastaavien rakenteellisista olosuhteista.Tietyssä operaatiossa on tarpeen suunnitella optimaaliset reaktio-olosuhteet, mukaan lukien pariutumislämpötila, pidennysaika jne., spesifisten olosuhteiden mukaan, kuten templaattityyppi, kohdefragmentin koko, monistetun fragmentin emässekvenssi ja alukkeen GC-pitoisuus ja pituus.

Varastointi

-20 ± 5 °C 2 vuoden ajan tai -80 °C pitkäaikaista varastointia varten.

  • Edellinen:
  • Seuraava:

    • Ei vahvistussignaaleja

    1. Pakkauksessa oleva Taq DNA -polymeraasi menettää aktiivisuutensa pakkauksen väärän säilytyksen tai vanhenemisen vuoksi.
    Suositus: Tarkista sarjan säilytysolosuhteet;lisää uudelleen sopiva määrä Taq DNA Polymerase PCR-järjestelmään tai osta uusi Real Time PCR Kit vastaavia kokeita varten.

    2. DNA-templaatissa on paljon Taq DNA -polymeraasin estäjiä.
    Ehdotus: Puhdista malli uudelleen tai vähennä käytetyn mallin määrää.

    3.Mg2+-pitoisuus ei ole sopiva.
    Suositus: Tarjoamamme 2× Real PCR -seoksen Mg2+-pitoisuus on 3,5 mM.Joidenkin erityisalukkeiden ja templaattien Mg2+-pitoisuus voi kuitenkin olla korkeampi.Siksi voit lisätä MgCl2:ta suoraan Mg2+-pitoisuuden optimoimiseksi.On suositeltavaa nostaa Mg2+ 0,5 mM joka kerta optimointia varten.

    4. PCR-monistusolosuhteet eivät ole sopivia, ja alukesekvenssi tai pitoisuus on väärä.
    Ehdotus: varmista alukesekvenssin oikeellisuus ja aluke ei ole hajonnut;jos vahvistussignaali ei ole hyvä, yritä alentaa hehkutuslämpötilaa ja säätää alukkeen konsentraatiota asianmukaisesti.

    5. Mallin määrä on liian vähän tai liikaa.
    Suositus: Suorita templaatin linearisointigradienttilaimennus ja valitse templaattikonsentraatio, jolla on paras PCR-vaikutus reaaliaikaiseen PCR-kokeeseen.

    NTC:llä on liian korkea fluoresenssiarvo

    1. Käytön aikana aiheutunut reagenssikontaminaatio.
    Suositus: Korvaa uusilla reagensseilla reaaliaikaisia ​​PCR-kokeita varten.

    2. PCR-reaktiojärjestelmän valmistuksen aikana tapahtui kontaminaatiota.
    Suositus: Suorita tarpeelliset suojatoimenpiteet käytön aikana, kuten: käytä lateksikäsineitä, käytä pipetin kärkeä suodattimella jne.

    3. Alukkeet hajoavat, ja alukkeiden hajoaminen aiheuttaa epäspesifistä monistumista.
    Ehdotus: Käytä SDS-PAGE-elektroforeesia havaitaksesi, ovatko alukkeet hajonneet, ja korvaa ne uusilla alukkeilla reaaliaikaisia ​​PCR-kokeita varten.

    Alukedimeeri tai epäspesifinen monistus

    1.Mg2+-pitoisuus ei ole sopiva.
    Suositus: Toimittamamme 2× Real PCR EasyTM Mixin Mg2+-pitoisuus on 3,5 mM.Joidenkin erityisalukkeiden ja templaattien Mg2+-pitoisuus voi kuitenkin olla korkeampi.Siksi voit lisätä MgCl2:ta suoraan Mg2+-pitoisuuden optimoimiseksi.On suositeltavaa nostaa Mg2+ 0,5 mM joka kerta optimointia varten.

    2.PCR-pariutuslämpötila on liian alhainen.
    Ehdotus: Nosta PCR-pariutuslämpötilaa 1 ℃ tai 2 ℃ joka kerta.

    3.PCR-tuote on liian pitkä.
    Suositus: Reaaliaikaisen PCR-tuotteen pituuden tulisi olla 100-150 bp, enintään 500 bp.

    4. Alukkeet hajoavat, ja alukkeiden hajoaminen johtaa spesifisen monistumisen ilmaantumiseen.
    Ehdotus: Käytä SDS-PAGE-elektroforeesia havaitaksesi, ovatko alukkeet hajonneet, ja korvaa ne uusilla alukkeilla reaaliaikaisia ​​PCR-kokeita varten.

    5.PCR-järjestelmä on väärä tai järjestelmä on liian pieni.
    Ehdotus: PCR-reaktiojärjestelmä on liian pieni, mikä saa havaitsemistarkkuuden heikkenemään.On parasta käyttää kvantitatiivisen PCR-laitteen suosittelemaa reaktiojärjestelmää reaaliaikaisen PCR-kokeen suorittamiseen uudelleen.

    Kvantitatiivisten arvojen huono toistettavuus

    1. Laite on viallinen.
    Ehdotus: Laitteen jokaisen PCR-reiän välillä voi olla virheitä, mikä voi johtaa huonoon toistettavuuteen lämpötilan hallinnan tai havaitsemisen aikana.Tarkista vastaavan laitteen ohjeiden mukaan.

    2. Näytteen puhtaus ei ole hyvä.
    Suositus: Epäpuhtaat näytteet johtavat kokeen huonoon toistettavuuteen, joka sisältää templaatin ja alukkeiden puhtauden.Templaatti on parasta puhdistaa uudelleen, ja alukkeet puhdistetaan parhaiten SDS-PAGE:lla.

    3.PCR-järjestelmän valmistelu- ja säilytysaika on liian pitkä.
    Ehdotus: Käytä reaaliaikaista PCR-järjestelmää PCR-kokeeseen heti valmistuksen jälkeen, äläkä jätä sitä sivuun liian pitkäksi aikaa.

    4. PCR-monistusolosuhteet eivät ole sopivia, ja alukesekvenssi tai pitoisuus on väärä.
    Ehdotus: varmista alukesekvenssin oikeellisuus ja aluke ei ole hajonnut;jos vahvistussignaali ei ole hyvä, yritä alentaa hehkutuslämpötilaa ja säätää alukkeen konsentraatiota asianmukaisesti.

    5.PCR-järjestelmä on väärä tai järjestelmä on liian pieni.
    Ehdotus: PCR-reaktiojärjestelmä on liian pieni, mikä saa havaitsemistarkkuuden heikkenemään.On parasta käyttää kvantitatiivisen PCR-laitteen suosittelemaa reaktiojärjestelmää reaaliaikaisen PCR-kokeen suorittamiseen uudelleen.

    Kirjoita viestisi tähän ja lähetä se meille

    LiittyvätTuotteet

    Paina Enter etsiäksesi tai ESC sulkeaksesi