ForeDirect RT-qPCR Kit
Sarjan kuvaus:
◮RNA:n suora reaaliaikainen monistus vanupuikkokokoelmista ilman RNA:n puhdistusprosesseja.Tämä sarja suorittaa qRT-PCR-syklit tunnin sisällä.Entsyymisekoitus on optimoitu sekoitus käänteiskopioijaentsyymiä, Hot-Start Taq DNA -polymeraasia ja RNaasi-inhibiittoria.Reaktiopuskuri sisältää kaikki tarvittavat komponentit, mukaan lukien optimoidut puskurikomponentit, Mg2+, dUTP ja dNTP.
Kuvaus
ForeDirect RT-qPCR Kit on suunniteltu RNA:n suoraan reaaliaikaiseen monistamiseen vanupuikkokokoelmista ilman RNA:n puhdistusprosesseja.Tämä sarja suorittaa qRT-PCR-syklit tunnin sisällä.Entsyymisekoitus on optimoitu sekoitus käänteiskopioijaentsyymiä, Hot-Start Taq DNA -polymeraasia ja RNaasi-inhibiittoria.Reaktiopuskuri sisältää kaikki tarvittavat komponentit, mukaan lukien optimoidut puskurikomponentit, Mg2+, dUTP ja dNTP.
Tekniset tiedot
100T
Sarjan komponentit
| Nukleiinihappoa vapauttava aine |
| RNA:ta suojaava aine |
| 2× RT-qPCR-puskuri |
| Entsyymiseos (Taq&M-MLV) |
| Ohjeet |
PCR-sovellus
1. Kun PCR-reaktioputkia on sentrifugoitu hetken, aseta ne monistuslaitteen näytesäiliöön.
2. Lämpöprotokolla
| Vaihe | Lämpötila | Aika | Pyörät | |
| 1 | Käänteinen transkriptio | 50℃ | 15 minuuttia | 1 |
| 2 | Esidenaturointi | 95℃ | 1 minuutti | 1 |
| 3 | Denaturaatio | 95℃ | 10 sekuntia | 42 |
| 4 | Hehkutus/pidennys | 60℃ | 30 sekuntia | |
Huomautus:Fluoresoiva signaali havaittiin välittömästi kunkin jakson laajennusvaiheen jälkeen.
3. Tallenna tiedosto asettamisen jälkeen ja suorita reaktio-ohjelma.
Käyttövaiheet
Ennen reagenssin valmistusta kaikki sarjan reagenssit tulee sulattaa huoneenlämmössä ja sekoittaa varovasti.
Reagenssin valmistus
1. Valmista Nucleic Acid Release Mix
| Komponentti | Tilavuus näytettä tai kontrollia kohti |
| Nukleiinihappoa vapauttava aine | 5 μl |
| RNA:ta suojaava aine | 0,5 µl |
2. Valmista reaktioseos
| Komponentti | Tilavuus näytettä tai kontrollia kohti |
| 2× RT-qPCR-puskuri | 15 μl |
| Entsyymiseos (Taq&M-MLV) | 1,5 µl |
| Pohjusteet ja anturit | 1 μl |
Varastointi ja säilyvyys
- Sarja tulee säilyttää -20± 5℃.Voimassaoloaika on 12 kuukautta.
- Vältä toistuvia pakastus-sulatusjaksoja (<5 jaksoa).
