QuickEasyᵀᴹ Reaaliaikainen PCR Kit-Taqman
Kuvaukset
2× QuickEasyTMQuickEasyn toimittama todellinen PCR Mix-TaqmanTMReal Time PCR Kit-Taqman -sarja on uuden sukupolven master mix -järjestelmä, joka on suunniteltu reaaliaikaiseen PCR-amplifikaatioreaktioon käyttämällä erityisiä fluoresoivia koettimia.Sen ydin Foregene HS Taq DNA Polymerase perustuu vasta-ainemodifikaatioon, jota käytetään yhdessä Foregenen edelleen optimoidun PCR-järjestelmän kanssa, ja sillä on korkeampi spesifisyys ja monistustehokkuus.Tavalliseen PCR-seokseen verrattuna sillä on vahvempi amplifikaatiokyky ja pienempi yhteensopimattomuussuhde.Sitä voidaan käyttää kvantitatiivisessa fluoresenssi-PCR-reaktiossa epäspesifisen monistumisen vähentämiseksi ja PCR:n tarkkuuden parantamiseksi.Se voi parantaa huomattavasti tuotteen spesifisyyttä ja reaktioherkkyyttä.Samaan aikaan ROX toimitettiin sisäisenä vertailuvärinä.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman -pakkauksella on laaja käyttöalue templaatin määrään, ja se voi saada hyvän standardikäyrän eri kvantitatiivisilla alueilla, ja se voi määrittää tarkasti ja havaita kohdegeenit hyvällä toistettavuudella ja suurella luotettavuudella.
Tekniset tiedot
200 valmistelua,500 valmistelua,1000 valmistelua,2000 valmistelut
Sarjan komponentit
QuickEasyTMReaaliaikainen PCR Kit-Taqman(20μljärjestelmä) | ||||
Sarjan sisältö | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 valmistelua | 500 valmistelua | 1000 valmistelua | 2000 valmistelut | |
2×NopeaHelppoTM Todellinen PCR Sekoita-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×ROX-referenssiväriaine | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
DNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
JOS SINÄ | 1pala | 1pala | 1pala | 1pala |
Ominaisuudet ja edut
■ Ainutlaatuinen PCR-optimointijärjestelmä tekee 2×QuickEasynTMReal PCR Mix-Taqman yhteensopivampi.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymeraseilla on korkeampi amplifikaatiotehokkuus, korkeampi vahvistusherkkyys ja korkeampi amplifikaatiospesifisyys.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman käyttää ainutlaatuista Foregenen optimoimaa järjestelmää parantamaan sekvenssispesifisen koettimen havaitsemisen herkkyyttä ja spesifisyyttä, jota voidaan käyttää genotyypitykseen ja kopiomäärän vaihtelun määritykseen ja saada tarkkoja tuloksia.
■ Tämän tuotteen mukana toimitetaan sisäinen ROX-referenssiväriaine, jota voidaan käyttää signaalin taustan ja signaalivirheiden poistamiseen kuoppien välillä, mikä on asiakkaiden kätevää käyttää erityyppisissä kvantitatiivisissa PCR-instrumenteissa.
Kit-sovellus
■ Fluoresenssikvantitatiivinen PCR templaatin kvantitatiivista analyysiä varten;
■ Cperinteinen PCR-monistus;
■ Voidaan käyttää alleelien havaitsemiseen.
Varastointi ja säilyvyys
Sarja tulee säilyttää -20°C:ssa pimeässä;jos sitä käytetään usein, se voidaan säilyttää myös 4 °C:ssa lyhyen aikaa (käytä 10 päivän kuluessa).
Reaaliaikainen PCR-alukkeen suunnitteluperiaatteet
Forward Primer ja Reverse Primer
Reaaliaikaisessa PCR:ssä alukkeen suunnittelu on erittäin tärkeää.Alukkeet liittyvät PCR-monistuksen spesifisyyteen ja tehokkuuteen, ja ne voidaan suunnitella seuraavien periaatteiden mukaisesti:
Alukkeen pituus: 18-30 bp.
GC-pitoisuus: 40-60 %.
Tm-arvo: Primer-suunnitteluohjelmisto, kuten Primer 5, voi antaa pohjamaalin Tm-arvon.Ylävirran ja alavirran alukkeiden Tm-arvojen tulisi olla mahdollisimman lähellä.Myös Tm-laskentakaavaa voidaan käyttää: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR:ää suoritettaessa pariutumislämpötilaksi valitaan yleensä lämpötila, joka on alle alukkeen Tm-arvon 5 °C (vastaava pariutumislämpötilan nousu voi lisätä PCR-reaktion spesifisyyttä).
Alukkeet ja PCR-tuotteet:
Suunnittelualukkeen PCR-amplifikaatiotuotteen pituus on edullisesti 100-150 bp.
Suunnittelupohjamaaleja mallin toissijaisessa rakennealueella tulee välttää mahdollisimman paljon.
Vältä kahden tai useamman komplementaarisen emäksen muodostumista ylävirran ja alavirran alukkeiden 3'-päiden väliin.
Primer 3′ -liitinpohjaa ei voi olla läsnä 3 ylimääräisellä peräkkäisellä G:llä tai C:llä.
Itse alukkeilla ei voi olla komplementaarisia rakenteita, muuten muodostuu hiusneularakenne, joka vaikuttaa PCR-monistukseen.
ATCG tulee jakaa mahdollisimman tasaisesti alukesekvenssissä, ja 3'-terminaalista emästä tulee välttää T:nä.
Liite 1: Cell Direct RT-qPCR Kit -komponentin lisäpaketti
1.Soluhajotusliuos
| |||
Sarjan komponentit (24-kuoppainen lyysijärjestelmä / kuoppa) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Osaminä | Puskuri CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puskuri ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
OsaII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Sekoitus
| |
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX-referenssiväri | 40 μl | 200 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |