Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNaasin kanssa) (Super Premix ensimmäisen juosteen cDNA-synteesiin lncRNA:sta)
Tekniset tiedot
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNaase) on käänteistranskriptiojärjestelmä, joka on erityisesti kehitetty lncRNA:lle poistamaan nopeasti genomisen DNA-kontaminaation.5×gDNase Mix voi nopeasti poistaa jäljellä olevan genomin RNA:ssa 42 °C:ssa 2 minuutin ajan, mikä välttää tehokkaasti genomin häiriön qPCR-tuloksiin.
5×L-RT HeroTM Mix sisältää Foregenen erityisesti kehittämää Foregene LncRNA Reverse Transcriptasea, joka on uudentyyppinen käänteiskopioija erityisesti lncRNA:ta ja muita pitkiä RNA-kompleksitemplaatteja varten, jolla on vahvempi RNA-affiniteetti ja korkeampi käänteinen tallennusteho.Optimoitu järjestelmä tekee käänteistranskriptionopeudesta nopeamman ja voi helposti transkriptoida RNA-templaatteja, joilla on korkea GC-pitoisuus ja monimutkainen sekundaarinen rakenne.Ensimmäisen juosteen cDNA-synteesi voidaan suorittaa 42 °C:ssa 15 minuutissa.
Sarjan komponentit
5× gDNase Mix |
5× L-RT HeroTM Mix |
RNaasi-vapaa ddH2O |
Ohjeet |
Ominaisuudet ja edut
■Tehokas kyky poistaa gDNA, joka voi poistaa gDNA:n mallista 2 minuutissa.
■ Se voi tehokkaasti kääntää lncRNA:n transkription.Kun käänteistranskriptiotuotteelle tehdään qPCR, Ct-arvo on pienempi kuin tavanomaisessa käänteistranskriptiojärjestelmässä.
■ Tehokas käänteistranskriptiojärjestelmä, kestää vain 15 minuuttia ensimmäisen juosteen cDNA:n synteesin loppuun saattamiseksi.
■ Monimutkaiset mallit: malleja, joissa on korkea GC-pitoisuus ja monimutkainen toisiorakenne, voidaan myös kääntää tehokkaasti.
■ Erittäin herkkä käänteistranskriptiojärjestelmä, pg-tason mallit voivat myös saada korkealaatuista cDNA:ta.
■ Käänteistranskriptiojärjestelmällä on korkea lämpöstabiilius, optimaalinen reaktiolämpötila on 42 °C℃, ja sillä on edelleen hyvä käänteisen transkription suorituskyky 50:ssä℃.
Kit-sovellus
lncRNA:n suhteellinen kvantitatiivinen analyysi.
lncRNA:n absoluuttinen kvantitatiivinen analyysi.
Se voi nopeasti ja tarkasti analysoida jälki-RNA:ta, kuten RNA-virusta.
Korkean GC-pitoisuuden tai monimutkaisen sekundaarirakenteen omaavien RNA-templaattien käänteistranskriptio.
Työnkulku
Varastointi ja säilyvyys
Sarja tulee säilyttää -20°C. Säilytä tuotetta tasalämpötilassa jääkaapissa -20°C heti vastaanottamisen jälkeen.Jos säilytysolosuhteet ovat sopivat, tuote ei heikennä suorituskykyä 1 vuoden voimassaoloaikana.
Ongelma-analyysiopas
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-spesifinen vahvistus
1. Kohtuuton pohjamaalisuunnittelu
Suositus: Suunnittele pohjamaalit pohjamaalien suunnitteluperiaatteiden mukaan.
2. Genomijäämät.
Suositus: Varmista, että gDNA:n poistoreaktion ensimmäinen vaihe on 42°C ja reaktioaikaa voidaan myös pidentää 5 minuuttiin.
Ei vahvistussignaalia RT-qPCR:llä
1. RNA hajoaa.
Suositus: RNA:n uuttamiseen käytettävän materiaalin tulee olla mahdollisimman tuoretta, ja siinä tulee käyttää korkealaatuista ja erittäin puhdasta RNA:ta.
2. RNA sisältää inhibiittoreita.
Suositus: Käänteistranskription estäjiä ovat yleensä SDS, guanidiinisuolat, EDTA jne. On suositeltavaa pestä RNA-sakka 70-prosenttisella etanolilla inhibiittoreiden poistamiseksi.
3. Pohjamaalin suunnitteluongelmat.
Suositus: Suunnittele pohjamaalit uudelleen tarkastusta varten pohjamaalien suunnitteluperiaatteen mukaisesti.
Kohdekaista näkyy tyhjässä ohjausobjektissa
1. Käyttötyökalujen tai reagenssien saastuminen.
Suositus: Kaikki kokeen reagenssit tai laitteet tulee autoklavoida.Ole varovainen ja varovainen käsitellessäsi, jotta DNA-näytteitä ei imeydy pipettiin tai vuoda ulos sentrifugiputkesta.
2. PCR-reaktiojärjestelmän valmistuksen aikana tapahtui kontaminaatiota.
Suositus: Noudata tarvittavia varotoimia käsittelyssä, kuten: käytä lateksikäsineitä, käytä suodatinkärkiä.Käytä Real Time PCR Mixiä likaantumattomassa järjestelmässä.
3. Pohjusteet ovat hajonneet.
Ehdotus: Käytä SDS-PAGE-elektroforeesia havaitaksesi, ovatko alukkeet hajonneet, ja korvaa ne uusilla alukkeilla fluoresenssin havaitsemiskokeita varten.
Käyttöopas: