Puhdistamattoman näytteen 2-kertaisen tiivistetyn esiseoksen valmistaja Kiinassa reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
Organisaatio noudattaa menettelykonseptia "tieteellinen hallinta, korkea laatu ja tehokkuus, ostaja ylivoimaisesti Kiinalle Valmistaja 2 × tiivistetylle esiseokselle puhdistamattomalle näytteelle Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Liiketoimintamme on sitoutunut tarjoamaan asiakkaillemme merkittäviä ja turvallisia huippulaatuisia tuotteita aggressiiviseen hintaan, mikä tekee jokaiselle asiakkaallemme tyytyväisiä.
Organisaatio noudattaa menettelykonseptia "tieteellinen johtaminen, korkea laatu ja tehokkuusensisija, ostajaChina Taq DNA -polymeraasi ja Qpcr, Yrityksellämme on runsaasti vahvuutta ja vakaa ja täydellinen myyntiverkostojärjestelmä.Toivomme, että voisimme luoda hyvät liikesuhteet kaikkien asiakkaiden kanssa kotimaassa ja ulkomailla molemminpuolisten hyötyjen pohjalta.
Reaaliaikainen PCR-alukkeen suunnitteluperiaatteet
Forward Primer ja Reverse Primer
Reaaliaikaisessa PCR:ssä alukkeen suunnittelu on erittäin tärkeää.Alukkeet liittyvät PCR-monistuksen spesifisyyteen ja tehokkuuteen, ja ne voidaan suunnitella seuraavien periaatteiden mukaisesti:
- Alukkeen pituus: 18-30 bp.
- GC-pitoisuus: 40-60 %.
- Tm-arvo: Primer-suunnitteluohjelmisto, kuten Primer 5, voi antaa pohjamaalin Tm-arvon.Ylävirran ja alavirran alukkeiden Tm-arvojen tulisi olla mahdollisimman lähellä.Myös Tm-laskentakaavaa voidaan käyttää: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR:ää suoritettaessa pariutumislämpötilaksi valitaan yleensä lämpötila, joka on alle alukkeen Tm-arvon 5 °C (vastaava pariutumislämpötilan nousu voi lisätä PCR-reaktion spesifisyyttä).
- Alukkeet ja PCR-tuotteet:
- Suunnittelualukkeen PCR-amplifikaatiotuotteen pituus on edullisesti 100-150 bp.
- Suunnittelupohjamaaleja mallin toissijaisessa rakennealueella tulee välttää mahdollisimman paljon.
- Vältä kahden tai useamman komplementaarisen emäksen muodostumista ylävirran ja alavirran alukkeiden 3'-päiden väliin.
- Primer 3′ -liitinpohjaa ei voi olla läsnä 3 ylimääräisellä peräkkäisellä G:llä tai C:llä.
- Itse alukkeilla ei voi olla komplementaarisia rakenteita, muuten muodostuu hiusneularakenne, joka vaikuttaa PCR-monistukseen.
- ATCG tulee jakaa mahdollisimman tasaisesti alukesekvenssissä, ja 3'-terminaalista emästä tulee välttää T:nä.
Liite1:Cell SuoraRT-qPCR Sarjan komponenttit lisäpaketti
1. Soluhajotusliuos
Soluhajotusliuos | |||
Sarjan komponentit (24-kuoppainen lyysijärjestelmä / kuoppa) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Osaminä | Puskuri CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puskuri ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
OsaII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-sekoitus | ||
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-referenssiväri | 40 μl | 200 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Organisaatio noudattaa menettelykonseptia "tieteellinen hallinta, korkea laatu ja tehokkuus, ostaja ylivoimaisesti Kiinalle Valmistaja 2 × tiivistetylle esiseokselle puhdistamattomalle näytteelle Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Liiketoimintamme on sitoutunut tarjoamaan asiakkaillemme merkittäviä ja turvallisia huippulaatuisia tuotteita aggressiiviseen hintaan, mikä tekee jokaiselle asiakkaallemme tyytyväisiä.
Kiinalainen valmistajaChina Taq DNA -polymeraasi ja Qpcr, Yrityksellämme on runsaasti vahvuutta ja vakaa ja täydellinen myyntiverkostojärjestelmä.Toivomme, että voisimme luoda hyvät liikesuhteet kaikkien asiakkaiden kanssa kotimaassa ja ulkomailla molemminpuolisten hyötyjen pohjalta.
Reaaliaikainen PCR-alukkeen suunnitteluperiaatteet
Forward Primer ja Reverse Primer
Reaaliaikaisessa PCR:ssä alukkeen suunnittelu on erittäin tärkeää.Alukkeet liittyvät PCR-monistuksen spesifisyyteen ja tehokkuuteen, ja ne voidaan suunnitella seuraavien periaatteiden mukaisesti:
- Alukkeen pituus: 18-30 bp.
- GC-pitoisuus: 40-60 %.
- Tm-arvo: Primer-suunnitteluohjelmisto, kuten Primer 5, voi antaa pohjamaalin Tm-arvon.Ylävirran ja alavirran alukkeiden Tm-arvojen tulisi olla mahdollisimman lähellä.Myös Tm-laskentakaavaa voidaan käyttää: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR:ää suoritettaessa pariutumislämpötilaksi valitaan yleensä lämpötila, joka on alle alukkeen Tm-arvon 5 °C (vastaava pariutumislämpötilan nousu voi lisätä PCR-reaktion spesifisyyttä).
- Alukkeet ja PCR-tuotteet:
- Suunnittelualukkeen PCR-amplifikaatiotuotteen pituus on edullisesti 100-150 bp.
- Suunnittelupohjamaaleja mallin toissijaisessa rakennealueella tulee välttää mahdollisimman paljon.
- Vältä kahden tai useamman komplementaarisen emäksen muodostumista ylävirran ja alavirran alukkeiden 3'-päiden väliin.
- Primer 3′ -liitinpohjaa ei voi olla läsnä 3 ylimääräisellä peräkkäisellä G:llä tai C:llä.
- Itse alukkeilla ei voi olla komplementaarisia rakenteita, muuten muodostuu hiusneularakenne, joka vaikuttaa PCR-monistukseen.
- ATCG tulee jakaa mahdollisimman tasaisesti alukesekvenssissä, ja 3'-terminaalista emästä tulee välttää T:nä.
Liite1:Cell SuoraRT-qPCR Sarjan komponenttit lisäpaketti
1. Soluhajotusliuos
Soluhajotusliuos | |||
Sarjan komponentit (24-kuoppainen lyysijärjestelmä / kuoppa) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Osaminä | Puskuri CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puskuri ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
OsaII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-sekoitus | ||
Sarjan komponentit (20 μl:n reaktiojärjestelmä) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-referenssiväri | 40 μl | 200 μl |
RNaasi-vapaa ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Käyttöohjeet: