Veren RNA:n eristyspakkaus
Sarjan kuvaus:
Cat.No.RE-04011/04013
RNA:n kokonaispuhdistus kokoverestä 104 ≤ Valkosolut ≤ 107
Eristä ja puhdista veren RNA nopeasti valkosoluista.
- Ei tarvitse huolehtia RNA:n hajoamisesta.Koko sarja on RNaasi-vapaa
-Yksinkertainen – kaikki toiminnot suoritetaan huoneenlämmössä
-Nopea – toiminta voidaan suorittaa 20 minuutissa
-Suuri RNA-saanto: Vain RNA:ta sisältävä pylväs ja ainutlaatuinen kaava voivat puhdistaa RNA:ta tehokkaasti
-Turvallinen - ei käytetä orgaanista reagenssia
-Suuri näytteenkäsittelykapasiteetti – jopa 200 μl näytteitä voidaan käsitellä joka kerta.
-Korkea laatu – puhdistettu RNA on erittäin puhdasta, vapaa proteiinista ja muista epäpuhtauksista, ja se sopii useisiin loppupään kokeisiin.
Kuvaukset
Pakkauksessa käytetään yrityksemme kehittämää spin-kolonnia ja kaavaa, joilla voidaan tehokkaasti erottaa erittäin puhdasta ja laadukasta kokonais-RNA:ta antikoaguloidusta kokoverestä.Sarja sisältää punasolulysaattia (Buffer RCL), joka voi nopeasti ja tehokkaasti hajottaa punasoluja ja säilyttää valkosoluja.Tehokas DNA-puhdistuspylväs voi helposti erottaa supernatantin ja solulysaatit sekä adsorboida ja poistaa genomisen DNA:n.Toiminta on yksinkertainen ja aikaa säästävä;Vain RNA:ta sisältävä pylväs voi sitoa RNA:ta tehokkaasti, ja ainutlaatuisella kaavalla se voi käsitellä suuren määrän näytteitä samanaikaisesti.
Koko järjestelmä RNaasi-Free tekee uutetusta RNA:sta hajoamattoman;Puskuri RW1 ja Buffer RW2 puskuripesujärjestelmä tekee saadusta RNA:sta vapaan proteiinista, DNA:sta, ioneista ja orgaanisista yhdisteistä.
Sarjan sisältö
| Blood Total RNA Isolation Kit | ||
| Sarjan koostumus | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 kertaa | 200 kertaa | |
| Puskuri RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Puskuri BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Puskuri BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Puskuri RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Puskuri RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNaasi-vapaa ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Vain RNA:ta sisältävä sarake | 50 sarjaa | 200 sarjaa |
| DNA-puhdistuskolonni | 50 sarjaa | 200 sarjaa |
| manuaalinen | 1 kopio | 1 kopio |
Ominaisuudet ja edut
- Ei tarvitse huolehtia RNA:n hajoamisesta.Koko sarja on RNaasi-vapaa.
-Yksinkertainen – kaikki toiminnot suoritetaan huoneenlämmössä.
-Nopea – toiminta voidaan suorittaa 20 minuutissa.
-Suuri RNA-saanto: Vain RNA:ta sisältävä pylväs ja ainutlaatuinen kaava voivat puhdistaa RNA:ta tehokkaasti.
-Turvallinen - orgaanista reagenssia ei käytetä.
-Suuri näytteenkäsittelykapasiteetti – jopa 200 μl näytteitä voidaan käsitellä joka kerta.
-Korkea laatu – puhdistettu RNA on erittäin puhdasta, vapaa proteiinista ja muista epäpuhtauksista, ja se sopii useisiin loppupään kokeisiin.
Sarjan parametrit
Sarjan sovellus:
Se soveltuu kokonais-RNA:n uuttamiseen ja puhdistamiseen nisäkkään kokoverestä.
Työnkulku
Varastointiolosuhteet
Puskuri RCL (10×) tulee säilyttää 2-8 ℃:ssa;Muut sarjan komponentit voidaan säilyttää huoneenlämmössä (15-25 ℃) kuivissa olosuhteissa, ja niitä voidaan säilyttää 12 kuukautta.Puskuria BRL1 voidaan säilyttää 4 ℃:ssa 1 kuukauden β-merkaptoetanolin (valinnainen) lisäämisen jälkeen.
Huomautus: Jos liuos säilytetään alhaisessa lämpötilassa, se on altis saostumiseen.Muista asettaa liuos pakkaukseen huoneenlämmössä jonkin aikaa ennen käyttöä.Esilämmitä sitä tarvittaessa 37°C vesihauteessa 10 minuuttia, jotta sakka liukenee, ja sekoita hyvin ennen käyttöä.
Ohjeita ongelmien analysointiin
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNA:ta ei voida uuttaa tai nukleiinihapon saanto on alhainen
Talteenottotehokkuuteen vaikuttavat yleensä monet tekijät, kuten: näytteen RNA-pitoisuus, toimintatapa, eluointitilavuus jne.
Yleisten syiden analyysi:
1.Jäähaude tai matalan lämpötilan (4 °C) sentrifugointi käytön aikana.
Suositus: Toiminta huonelämpötilassa (15-25 °C), ei koskaan jäähaudetta ja matalalämpötilainen sentrifugi.
2. Väärä näytteiden säilytys tai liian pitkä näytteen säilytys.
Suositus: Säilytä näytteet -80 °C:ssa tai jäädytä nestetypessä ja vältä toistuvaa pakastusta ja sulatusta;yritä käyttää juuri kerättyjä näytteitä RNA:n uuttamiseen.
3. Riittämätön näytteen hajoaminen
Suositus: Varmista, että näyte ja työliuos (lineaarinen akryyliamidi) on sekoitettu huolellisesti ja inkuboitu 10 minuuttia huoneenlämmössä (15-25 °C).
4. Eluentti lisättiin väärin
Suositus: Varmista, että RNase-Free ddH2O on lisätty puhdistuskolonnin kalvon keskelle
5. Väärä tilavuus vedetöntä etanolia puskurissa viRW2
Suositus: Noudata ohjeita, lisää oikea määrä vedetöntä etanolia Buffer viRW2:een ja sekoita ne hyvin ennen sarjan käyttöä.
6.Väärä näytteen käyttö.
Suositus: 200 µl näytettä per 500 µl puskuria viRL.Liiallinen näytetilavuus vähentää RNA:n uuttonopeutta.
7.Väärä eluutiotilavuus tai epätäydellinen eluointi.
Suositus: Puhdistuskolonnin eluenttitilavuus on 30-50 μl;jos eluointiteho ei ole tyydyttävä, on suositeltavaa lisätä esilämmitettyä RNaasi-Free ddH:ta2O ja pidennä huoneenlämpötilaan asettamisen aikaa, esim. 5-10 min
8. Puhdistuskolonnissa on etanolijäännös puskurissa viRW2 huuhtelun jälkeen.
Suositus: Jos etanolia on vielä jäljellä puskurissa viRW2 huuhtelun ja 2 minuutin tyhjän putken sentrifugoinnin jälkeen, puhdistuspylväs voidaan jättää huoneenlämpötilaan 5 minuutiksi tyhjässä putkessa sentrifugoinnin jälkeen jäljellä olevan etanolin poistamiseksi kokonaan.
Puhdistettujen RNA-molekyylien hajoaminen
Puhdistetun RNA:n laatu liittyy tekijöihin, kuten näytteen varastointiin, RNaasikontaminaatioon ja toimintaan.
Yleisten syiden analyysi:
1. Kerättyjä näytteitä ei tallennettu ajoissa.
Suositus: Jos näytettä ei käytetä ajoissa keräämisen jälkeen, säilytä se välittömästi -80 ℃:ssa tai nestetypessä.Yritä käyttää RNA-molekyylien uuttamiseen juuri kerättyjä näytteitä aina kun mahdollista.
2. Kerätyt näytteet jäädytettiin ja sulatettiin toistuvasti.
Suositus: Vältä toistuvaa pakastusta ja sulattamista (enintään kerran) näytteenoton ja varastoinnin aikana, muuten nukleiinihapon saanto vähenee.
3. RNase tuotiin leikkaussaliin tai kertakäyttökäsineitä, naamioita jne. ei käytetty.
Ehdotus: RNA-molekyylien uuttokoe suoritetaan parhaiten erillisessä RNA-leikkaussalissa ja koepöytä puhdistetaan ennen koetta.Käytä kertakäyttökäsineitä ja naamioita kokeen aikana välttääksesi RNAasin aiheuttaman RNA:n hajoamisen.
4. Reagenssi on kontaminoitunut RNaasilla käytön aikana.
Ehdotus: Korvaa uudella virus-RNA:n eristyspakkauksella vastaavia kokeita varten.
5.Sentrifugiputkien, pipetin kärkien jne. RNaasi-kontaminaatio. Ehdotus: Varmista, että sentrifugiputket, pipetin kärjet ja pipetit ovat kaikki RNaasivapaita.
Puhdistetut RNA-molekyylit vaikuttivat alavirran kokeisiin
Puhdistuskolonnissa puhdistetut RNA-molekyylit vaikuttavat alavirran kokeisiin, jos suola-ioneja tai proteiineja on liikaa, kuten: käänteistranskriptio, Northern blot jne.
1. Eluoiduissa RNA-molekyyleissä on jäljellä suola-ioneja.
Suositus: Varmista, että Puffer viRW2:een on lisätty oikea määrä vedetöntä etanolia, ja pese puhdistuskolonni kahdesti käyttöohjeen oikean sentrifugointinopeuden mukaisesti；Jos suola-ioneja on vielä jäljellä, voit lisätä puhdistuskolonniin Buffer viRW2:ta ja jättää sen huoneenlämpöön 5 minuutiksi.Suorita sitten sentrifugointi suola-ionien kontaminaatioiden poistamiseksi suurimmassa määrin
2. Eluoiduissa RNA-molekyyleissä on jäljellä etanolia
Suositus: Kun olet varmistanut, että puhdistuskolonnit on huuhdeltu Buffer viRW2:lla, suorita sentrifugointi tyhjässä putkessa käyttöohjeessa olevan keskipakonopeuden mukaisesti.Jos etanolia on vielä jäljellä, se voidaan jättää 5 minuutiksi huoneenlämpötilaan tyhjässä putkessa suoritetun sentrifugoinnin jälkeen jäljellä olevan etanolin poistamiseksi suurimmassa määrin.
Käyttöohjeet:
Viral RNA Isolation Kit -ohjekirja
