Esittely:

RNA-molekyylit voivat olla laajasti vuorovaikutuksessa muiden biologisten molekyylien, kuten proteiinin, DNA:n ja RNA:n, kanssa ja siten esiintyä soluissa ja organismeissa makromolekyylikompleksien muodossa.Niiden joukossa RNA-proteiinikompleksit ovat RNA:n olemassaolo ja toiminta Yksi tärkeimmistä muodoista.RNA pull-down on klassinen menetelmä RNA-molekyylien, erityisesti lncRNA-molekyylien vuorovaikutuksessa olevien proteiinien, seulomiseen ja tunnistamiseen, ja useimmat tutkijat ja kansainväliset arvovaltaiset akateemiset lehdet tunnustavat sen.Tänään FORREGENE jakaa kanssasi RNA-vedon kokeellisen periaatteen ja teknisen prosessin, ehkä voit käyttää sitä

1. RNA pull down -tekniikan kokeellinen periaate:

Biotiinilla leimatun kohde-lncRNA:n tai lncRNA-fragmenttien (mukaan lukien positiivisena ja negatiivisena kontrollina käytetyt RNA-fragmentit) in vitro -transkriptio ja synteesi ja inkubointi solu-uutteiden kanssa;käytä avidiiniankkuroituja magneettihelmiä RNA-proteiini- tai RNA-RNA-kompleksien keräämiseen. Perusteellisen pesun jälkeen kompleksi eluoituu.Jos havaitset proteiinikohdemolekyylin, joka on vuorovaikutuksessa lncRNA:n kanssa, suorita proteiinielektroforeesi RNA-pull-down -tuotteelle, havaitse kohdeproteiini hopeavärjäyksellä ja leikkaa geeli massaspektrometriaa varten;suorittaa myös suoraan Western blot -varmennus alasvetotuotteelle;jos havaitaan RNA-kohdemolekyyleille, jotka ovat vuorovaikutuksessa lncRNA:n kanssa, RNA-pull-down -tuotteet alistetaan RNA-uuttoon ja suoritetaan spesifinen qRT-PCR-detektio.

2. RNA pull down -teknologian kokeiluprosessi:

3. FOREGENEN RNA:n purkamisen tekninen palvelu:

Soluviljely

Solujen kokonais-/ydin-/plasmaproteiiniuutteen valmistus

RNA pull down -koe

SDS-PAGE elektroforeesi, hopeavärjäys

Massaspektrometria ja WB-kokeet

Kokeellinen raportti

4. Kokeellinen tapaus

Seuraavassa kuvassa on FJ Bio-Bion RNA-vedon ja SDS-PAGE-elektroforeesitunnistuksen tulokset, joissa punainen nuoli osoittaa erovyöhykkeen:

Sichuanin yliopiston professori Song Xun tutkimusryhmälle on kertynyt 15 vuoden pitkäaikainen kertyminen lncRNA-tutkimuksen alalla.Foregene Bio ja professori Song Xun tutkimusryhmä tekivät yhteistyötä käynnistääkseen lncRNA:n RNA pull down -teknologian, joka antaa sinulle tyydyttävän tuloksen kokeellesi.