SOP-järjestelmän rakentaminen

Luo PCR-kokeilu SOP koehenkilöstön käyttäytymisen standardoimiseksi.

Kokeilijat noudattavat tiukasti toimintaohjeita ja minimoivat inhimillisistä tekijöistä mahdollisesti aiheutuvan PCR-saasteen tai estävät saastumisen esiintymisen operaatiossa.Lisäksi kokeen tekijällä tulee olla vastaavat ammatilliset tiedot ja taidot, mukaan lukien asiantuntemus asiaan liittyvien laitteiden käytössä, koko työprosessin selkeyttäminen, kontaminaatioiden käsittelymenetelmien ja laboratorion laadunvalvontamenetelmien hallinta sekä kyky tulkita testituloksia oikein.

Rakennusstandardi PCR-laboratorio

PCR-laboratorio on periaatteessa jaettu neljään osa-alueeseen, jotka ovat reagenssin valmistusalue, näytteenkäsittelyalue, monistusalue ja monistustuotteen analyysialue.Kaksi ensimmäistä aluetta ovat vahvistusta edeltäviä alueita, ja kaksi viimeistä aluetta ovat vahvistuksen jälkeisiä alueita.Vahvistusta edeltävä vyöhyke ja vahvistuksen jälkeinen vyöhyke tulisi erottaa tiukasti toisistaan.Koemateriaalit, reagenssit, tallennuspaperi, kynät, puhdistusaineet jne. voivat virrata vain esivahvistusalueelta jälkimonistuksen alueelle, eli reagenssin valmistelualueelta, näytteenkäsittelyalueelta, monistusalueelta ja monistustuotteen analyysialueelta, eivätkä ne saa virrata päinvastaiseen suuntaan.Laboratorion ilmavirran tulee myös virrata esivahvistusalueelta vahvistuksen jälkeiselle alueelle, ei päinvastaiseen suuntaan.

Vähennä kokeellisia vaiheita

Jos laboratorio suorittaa vain PCR-detektiota ja -tunnistusta, on suositeltavaa käyttää fluoresoivaa kvantitatiivista PCR:ää tavanomaisen PCR:n sijaan.

Fluoresenssikvantitatiiviset PCR-detektiotulokset voidaan kerätä ja analysoida fluoresoivilla signaaleilla, joten kantta ei tarvitse avata elektroforeesia varten reaktion jälkeen, jolloin vältetään PCR-tuotteiden saastuminen, joka aiheutuu reaktiotuotteiden vuotamisesta aerosoleiksi.Jos lisäät korkin aukkojen määrää geelielektroforeesin latausvaiheen aikana, aerosolikontaminaatiota tapahtuu todennäköisesti.On suositeltavaa edistää kvantitatiivisen PCR:n käyttöä ja korvata asteittain kvalitatiivinen PCR.

Otetaan käyttöön UNG:n saastumisenestojärjestelmä

PCR-reaktioon käytetään UNG:n anti-PCR-tuotteen kontaminaatiojärjestelmää.

Järjestelmä käyttää dUTP:tä dTTP:n sijaan.PCR-reaktion jälkeen kaikki PCR-tuotteet (DNA-fragmentit) liitetään dUTP:hen;seuraavassa PCR-reaktion kierroksella järjestelmään lisättyä UNG-entsyymiä inkuboidaan 37 °C:ssa 5 minuuttia ennen PCR:ää, joka voi olla spesifinen. Hajota kaikki dUTP:tä sisältävät DNA-fragmentit ja suorita sitten PCR-reaktio.Tämä voi poistaa PCR-tuotteiden aiheuttaman aerosolikontaminaation kokonaan.Vaikutus näkyy alla olevassa kuvassa:

Huomautus: Suoraan PCR-sarjaan voit valita FJ Biotechin anti-PCR-tuotteiden saastumisjärjestelmän sarjatuotteet

Ehdottaa

Laajamittaista genotyyppitestausta tekeville laboratorioille on erittäin suositeltavaa käyttää UNG anti-PCR -tuotteiden kontaminaatiojärjestelmää reagenssien testaamiseen kohtuullisten laboratorioiden rakentamisen lisäksi.

Muistutus: Tämän järjestelmän käyttö ei voi poistaa jo aiheutettua PCR-tuotteen kontaminaatiota.Siksi UNG-järjestelmää tulisi käyttää asiaankuuluvan testin alussa, ja UNG-järjestelmää tulisi aina käyttää PCR-monistukseen, jotta estetään PCR-tuotteiden saastuminen.Väärä positiivinen.

On suositeltavaa käyttää Forge Biotechin Direct PCR-UNG -järjestelmää suoritettaessa laajamittaisia ​​testejä, kuten: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG；

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Tämä Foregenen sarjasarja ei ainoastaan ​​pysty suorittamaan PCR-detektiota nopeasti ja suuressa mittakaavassa, vaan myös tehokkaasti ehkäisemään ja hallitsemaan PCR-tuotteiden kontaminaatiota.