Nukleiinihappouutto on johdantotaito molekyylibiologian kokeisiin.Se, pystyykö se hallitsemaan ja käyttämään tätä taitoa taitavasti, on myös tullut edellytykseksi myöhempien kokeilijoiden päivittää kokeelliseksi mestariksi.
Erilaisten tutkimusmateriaalien mukaan kokeilijat jaetaan pääasiassa kolmeen tyyppiin:
Pääaine eläintiede, kasvitiede, mikrobiologia
Jokainen kokeilijatyyppi jatkaa kopioiden kopioimista kehittääkseen ainutlaatuisia taitoja tiettyjä näytteitä varten.
Tänään toimittaja haluaa tuoda kokeilun tekijöille joitain laitteita ja rekvisiitta, joita ei ole saatavilla vankityrmän kautta.Niiden avulla voit päivittää nopeasti kaikkiin suuntiin.Ei ole unelma tulla kokeelliseksi jumalaksi.
Tämä numero on tarkoitettu kasvien ammattikokeilijoille (muiden ammattien kokeilijat voivat myös oppia siitä~).
Uskon, että jokainen kokeilijoiden sukupolvi on kuullut klassisista kasvien nukleiinihappojen uuttomenetelmistä, jotka ovat siirtyneet sukupolvelta toiselle edeltäjiltään.Kasvien louhintateollisuuden kolme suurta nimeä.
Vaikka isot kaverit ovat erinomaisia, heillä on silti joitain väistämättömiä puutteita.
TRIzol-menetelmä
Käytetään usein purkamiseen
RNA
●Myrkyllistä ja hankalia
●Sisältää genomin kontaminaatiota
CTAB-menetelmä
Käytetään usein purkamiseen
perimäDNA
●Aikaa vievää
● CTAB on vaikeampi poistaa pesemällä kuin suola, pienellä määrällä jäämiä on valtava vaikutus entsyymiaktiivisuuteen.
SDS-menetelmä
Käytetään usein purkamiseen
plasmidi
●Ei sovellu kasveille, joissa on korkea polysakkaridipitoisuus
● Proteiinikontaminaatio
Tässä modernissa yhteiskunnassa, jossa on kaksinopeuksiset päivitysiteraatiot, perinteiset toimintatavat eivät enää pysty vastaamaan kokeilijoiden tarpeisiin, ja laitepäivitykset ovat lähellä.
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit on testattu N kertaa kymmenien kokeiden toimesta.Se on yksinkertainen käyttää, ei käytä myrkyllisiä reagensseja eikä lisää entsyymejä.Saatu nukleiinihappo on erittäin puhdasta, mikä on välttämätöntä erinomaisten kokeiden päivittäiselle uuttotoiminnalle.
Foregene RNA -eristyspakkaus
Tässä paljastan kokeiden tekijöille myös piilotetun toimintatekniikan, joka on sopivan uuttomenetelmän valinta kasvityypin mukaan (kasvityypin määritysmenetelmä artikkelin lopussa!), koska osa kasvipolysakkarideista ja polyfenoleista on pitoisuuksia ja perinteiset menetelmät ovat tappavia.Ei riitä hallitsemaan.
No se on näin...
TRIzol-menetelmä polvistui suoraan näytteiden alle, joissa oli runsaasti polysakkarideja ja polyfenoleja, kuten banaaninlehtiä, ginkgon lehtiä ja puuvillanlehtiä.
Tätä tarkoitusta varten Foregene on kehittänyt kaksi tehokasta työkalua kokeilijoille.Kasvi-RNA:n uuttosarja, jossa on alhainen polysakkaridi- ja polyfenolipitoisuus sekä korkea polysakkaridi- ja polyfenolipitoisuus, voi tappaa viholliset kohdistetusti, jolloin kokeen tekijät eivät enää pelkää erilaisia kasveja.Vaihda vain varusteet suoraan!
Uuttomenetelmän päivitystarpeen lisäksi myös näytteiden esikäsittelytoiminnot on päivitettävä.
Kasvinäytteiden erityisen rakenteen vuoksi joidenkin kasvien juuret ja sitkeämmät varret on vaikeampi jauhaa ja murskata tasaisesti.
Jauhatusteollisuudessa noin 80 % ihmisistä käyttää jauhamiseen nestemäistä typpeä, kun taas alle 20 % käyttää sähköhiontaa ja hiomahelmien värähtelyä.
Vaikka nestemäisellä typellä jauhaminen on halpaa ja helppokäyttöistä, se on painajainen kokeilijoille, joilla on suuri näytteen tarve jauhaa joka kerta ja vaivaa!Jos laastia ei puhdisteta, se aiheuttaa ristikontaminaation näytteiden välillä.
Sähköhionnan vaikutus vaihtelee henkilöittäin ja kokeiden toimintatottumukset vaikuttavat enemmän nukleiinihapon eheyteen, ja tarvittaessa tarvitaan matalan lämpötilan toimintaa.
joten hiontahelmen värähtelyä voidaan pitää nykyisenä yksinkertaisena ja tehokkaana hiomalaitteistona.
Yleisiä värähtelymuotoja ovat pystyvärähtely, vaakasuuntainen edestakainen värähtely ja kolmiulotteinen (horisontaalinen oskillaatio).Foregenen pehmopaperimurskain kuitenkin murtaa nykyisen mallin ja ottaa käyttöön uuden 4D-värähtelymenetelmän tehdäkseen jauhamisesta tasaisempaa.
Täytä erilaisia näytevaatimuksia, helppo käyttää
Ainutlaatuinen 4D-murskaustekniikka, murskaustehokkuus kasvaa 20 %
Näyte on täysin suljettu, ei ristikontaminaatiota
Hiljainen, ≤56 desibeliä
Vertaa kokeen tuloksia aaltoon~
Testinäyte: 50 mg vehnänlehtiä (vähäinen polysakkaridien ja polyfenolien pitoisuus)
Uute nukleiinihappotyyppi: RNA
Pistemäärä: 5μl
Käytetty uuttosarja on Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)
Verrattaessa tietoja ja elektroforeesikäyrää voidaan nähdä, että konejauhatuksen jälkeen uutetun RNA:n pitoisuus ja puhtaus on korkeampi kuin nestetyppijauhatuksella.Samalla, koska konehionta voi rikkoa näytteen täydellisemmin, pieni RNA voidaan uuttaa paremmin ja RNA:n eheys voidaan säilyttää.
Testinäyte: 50 mg ginkgon lehtiä (korkea polysakkaridi- ja polyfenolipitoisuus)
Uute nukleiinihappotyyppi: RNA
Pistemäärä: 5μl
Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05021) käyttö
Katsokaa tätä näyteryhmää, jossa on korkea polysakkaridi- ja polyfenolipitoisuus.Vaikutus on vielä selvempi.Samalla puhtaudella konejauhatun RNA:n pitoisuus on lähes 5 kertaa nestemäisen typen jauhamiseen verrattuna, ja pieni RNA on edelleen heikosti näkyvissä~
Jos sinusta tuntuu, että mikään yllä olevista laitteista ei ole tarpeeksi nopea, toimittajan on keksittävä paras laitteisto!
Plant Direct PCR-sarja
Tämän laitteiston ainutlaatuinen ominaisuus on, että kasvin lehtiä tai siemeniä ei tarvitse jauhaa ja murskata, vaan ne heitetään suoraan EP-putkeen hajotusta varten, ja tuloksena olevaa lyysiseosta voidaan käyttää mallina PCR-reaktiossa.Se on yhtä helppoa kuin askeleen nopeampi!Samaan aikaan Foregene Plantsin suorat PCR-sarjat on varustettu UNG-saastumisenestojärjestelmällä, jotta kokeen tekijät eivät enää murehdi aerosolipäästöjä laboratoriossa ja voivat helposti suorittaa kokeen.
Tuomiovinkkejä:
Kuinka arvioida, onko kyseessä polysakkaridipolyfenolikasvi
Ota noin 20 mg kudoslohko ja laita se puhtaaseen 1,5 ml:n sentrifugiputkeen, lisää 200 ul 200 mM NaOH-liuosta, aseta se 95 ℃:seen 10 minuutiksi, tarkkaile värin muutosta hajoamisen jälkeen.
1. Jos lysaatin väri on vihreä tai vaaleankeltainen, se tarkoittaa, että kudospolyfenolien pitoisuus on alhainen ja on suositeltavaa käyttää Foregene Plant -sarjaa
2. Jos lysaatti on ruskeankeltaista tai ruskehtavan punaista, se tarkoittaa, että kudoksen polyfenolipitoisuus on korkea, ja on suositeltavaa käyttää Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus -sarjaa.
Postitusaika: 20.8.2021
