Viruksen RNA:n eristyspakkaus virus-RNA:n puhdistamiseen plasmasta, seerumista ja muista näytteistä
Sarjan kuvaus:
Luett.nro.RE-02011/02014
Viruksen RNA:n puhdistamiseen plasmasta, seerumista, soluttomista ruumiinnesteistä, soluviljelmien supernatanteista.
Eristä ja puhdista virus-RNA nopeasti näytteistä, kuten plasmasta, seerumista, soluttomista ruumiinnesteistä ja soluviljelmien supernatanteista.
- Ei tarvitse huolehtia RNA:n hajoamisesta.Koko sarja on RNaasi-vapaa
-Yksinkertainen – kaikki toiminnot suoritetaan huoneenlämmössä
-Nopea – toiminta voidaan suorittaa 20 minuutissa
-Suuri RNA-saanto: Vain RNA:ta sisältävä pylväs ja ainutlaatuinen kaava voivat puhdistaa RNA:ta tehokkaasti
-Turvallinen - ei käytetä orgaanista reagenssia
-Suuri näytteenkäsittelykapasiteetti – jopa 200 μl näytteitä voidaan käsitellä joka kerta.
-Korkea laatu – puhdistettu RNA on erittäin puhdasta, vapaa proteiinista ja muista epäpuhtauksista, ja se sopii useisiin loppupään kokeisiin.
Kuvaukset
Pakkaus käyttää Foregenen kehittämää spin-kolonnia ja kaavaa, joka voi tehokkaasti uuttaa erittäin puhdasta ja korkealaatuista virus-RNA:ta näytteistä, kuten plasmasta, seerumista, soluttomasta kehon nesteestä ja soluviljelmän supernatantista.Sarja lisää erityisesti lineaarista akryyliamidia, joka voi helposti siepata pieniä määriä RNA:ta näytteistä.Vain RNA-pylväs voi sitoa RNA:ta tehokkaasti.Sarja pystyy käsittelemään suuren määrän näytteitä samanaikaisesti.
Koko pakkaus ei sisällä RNaasia, joten puhdistettu RNA ei hajoa.Puskuri viRW1 ja puskuri viRW2 voivat varmistaa, että saatu virusnukleiinihappo ei sisällä proteiinia, nukleaasia tai muita epäpuhtauksia, joita voidaan käyttää suoraan alavirran molekyylibiologian kokeisiin.
Tekniset tiedot
50 valmistelua, 200 valmistelua
Sarjan komponentit
| Lineaarinen akryyliamidi |
| Puskuri viRL |
| Puskuri viRW1, puskuri viRW2 |
| RNaasi-vapaa ddH2O |
| RNA-vain sarake |
| Ohjeet |
Ominaisuudet ja edut
- Ei tarvitse huolehtia RNA:n hajoamisesta.Koko sarja on RNaasi-vapaa
-Yksinkertainen – kaikki toiminnot suoritetaan huoneenlämmössä
-Nopea – toiminta voidaan suorittaa 20 minuutissa
-Suuri RNA-saanto: Vain RNA:ta sisältävä pylväs ja ainutlaatuinen kaava voivat puhdistaa RNA:ta tehokkaasti
-Turvallinen - ei käytetä orgaanista reagenssia
-Suuri näytteenkäsittelykapasiteetti – jopa 200 μl näytteitä voidaan käsitellä joka kerta.
-Korkea laatu – puhdistettu RNA on erittäin puhdasta, vapaa proteiinista ja muista epäpuhtauksista, ja se sopii useisiin loppupään kokeisiin.
Sarjan parametrit
Sarjan sovellus:
Se soveltuu viruksen RNA:n uuttamiseen ja puhdistamiseen näytteistä, kuten plasmasta, seerumista, soluttomasta kehon nesteestä ja soluviljelysupernatantista.
Työnkulku
Varastointiolosuhteet
- Sarjaa voidaan säilyttää 24 kuukautta huoneenlämmössä (15-25 ℃) tai 2-8 ℃ pidempään.
-Lineaarista akryyliamidiliuosta voidaan säilyttää huoneenlämmössä 7 päivää.Kun olet saanut sarjan, ota Linear Acrylamide -liuos pois ja säilytä sitä -20 ℃:ssa.
-Lineaarisen akryyliamidin lisäämisen jälkeen Buffer viRL -puskuriin sitä voidaan säilyttää 2-8 ℃:ssa jopa 48 tuntia.Käytä tuoretta liuosta.
Ohjeita ongelmien analysointiin
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNA:ta ei voida uuttaa tai nukleiinihapon saanto on alhainen
Talteenottotehokkuuteen vaikuttavat yleensä monet tekijät, kuten: näytteen RNA-pitoisuus, toimintatapa, eluointitilavuus jne.
Yleisten syiden analyysi:
1.Jäähaude tai matalan lämpötilan (4 °C) sentrifugointi käytön aikana.
Suositus: Toiminta huonelämpötilassa (15-25 °C), ei koskaan jäähaudetta ja matalalämpötilainen sentrifugi.
2. Väärä näytteiden säilytys tai liian pitkä näytteen säilytys.
Suositus: Säilytä näytteet -80 °C:ssa tai jäädytä nestetypessä ja vältä toistuvaa pakastusta ja sulatusta;yritä käyttää juuri kerättyjä näytteitä RNA:n uuttamiseen.
3. Riittämätön näytteen hajoaminen
Suositus: Varmista, että näyte ja työliuos (lineaarinen akryyliamidi) on sekoitettu huolellisesti ja inkuboitu 10 minuuttia huoneenlämmössä (15-25 °C).
4. Eluentti lisättiin väärin
Suositus: Varmista, että RNase-Free ddH2O on lisätty puhdistuskolonnin kalvon keskelle
5. Väärä tilavuus vedetöntä etanolia puskurissa viRW2
Suositus: Noudata ohjeita, lisää oikea määrä vedetöntä etanolia Buffer viRW2:een ja sekoita ne hyvin ennen sarjan käyttöä.
6.Väärä näytteen käyttö.
Suositus: 200 µl näytettä per 500 µl puskuria viRL.Liiallinen näytetilavuus vähentää RNA:n uuttonopeutta.
7.Väärä eluutiotilavuus tai epätäydellinen eluointi.
Suositus: Puhdistuskolonnin eluenttitilavuus on 30-50 μl;jos eluointiteho ei ole tyydyttävä, on suositeltavaa lisätä esilämmitettyä RNaasi-Free ddH:ta2O ja pidennä huoneenlämpötilaan asettamisen aikaa, esim. 5-10 min
8. Puhdistuskolonnissa on etanolijäännös puskurissa viRW2 huuhtelun jälkeen.
Suositus: Jos etanolia on vielä jäljellä puskurissa viRW2 huuhtelun ja 2 minuutin tyhjän putken sentrifugoinnin jälkeen, puhdistuspylväs voidaan jättää huoneenlämpötilaan 5 minuutiksi tyhjässä putkessa sentrifugoinnin jälkeen jäljellä olevan etanolin poistamiseksi kokonaan.
Puhdistettujen RNA-molekyylien hajoaminen
Puhdistetun RNA:n laatu liittyy tekijöihin, kuten näytteen varastointiin, RNaasikontaminaatioon ja toimintaan.
Yleisten syiden analyysi:
1. Kerättyjä näytteitä ei tallennettu ajoissa.
Suositus: Jos näytettä ei käytetä ajoissa keräämisen jälkeen, säilytä se välittömästi -80 ℃:ssa tai nestetypessä.Yritä käyttää RNA-molekyylien uuttamiseen juuri kerättyjä näytteitä aina kun mahdollista.
2. Kerätyt näytteet jäädytettiin ja sulatettiin toistuvasti.
Suositus: Vältä toistuvaa pakastusta ja sulattamista (enintään kerran) näytteenoton ja varastoinnin aikana, muuten nukleiinihapon saanto vähenee.
3. RNase tuotiin leikkaussaliin tai kertakäyttökäsineitä, naamioita jne. ei käytetty.
Ehdotus: RNA-molekyylien uuttokoe suoritetaan parhaiten erillisessä RNA-leikkaussalissa ja koepöytä puhdistetaan ennen koetta.Käytä kertakäyttökäsineitä ja naamioita kokeen aikana välttääksesi RNAasin aiheuttaman RNA:n hajoamisen.
4. Reagenssi on kontaminoitunut RNaasilla käytön aikana.
Ehdotus: Korvaa uudella virus-RNA:n eristyspakkauksella vastaavia kokeita varten.
5.Sentrifugiputkien, pipetin kärkien jne. RNaasi-kontaminaatio. Ehdotus: Varmista, että sentrifugiputket, pipetin kärjet ja pipetit ovat kaikki RNaasivapaita.
Puhdistetut RNA-molekyylit vaikuttivat alavirran kokeisiin
Puhdistuskolonnissa puhdistetut RNA-molekyylit vaikuttavat alavirran kokeisiin, jos suola-ioneja tai proteiineja on liikaa, kuten: käänteistranskriptio, Northern blot jne.
1. Eluoiduissa RNA-molekyyleissä on jäljellä suola-ioneja.
Suositus: Varmista, että Puffer viRW2:een on lisätty oikea määrä vedetöntä etanolia, ja pese puhdistuskolonni kahdesti käyttöohjeen oikean sentrifugointinopeuden mukaisesti；Jos suola-ioneja on vielä jäljellä, voit lisätä puhdistuskolonniin Buffer viRW2:ta ja jättää sen huoneenlämpöön 5 minuutiksi.Suorita sitten sentrifugointi suola-ionien kontaminaatioiden poistamiseksi suurimmassa määrin
2. Eluoiduissa RNA-molekyyleissä on jäljellä etanolia
Suositus: Kun olet varmistanut, että puhdistuskolonnit on huuhdeltu Buffer viRW2:lla, suorita sentrifugointi tyhjässä putkessa käyttöohjeessa olevan keskipakonopeuden mukaisesti.Jos etanolia on vielä jäljellä, se voidaan jättää 5 minuutiksi huoneenlämpötilaan tyhjässä putkessa suoritetun sentrifugoinnin jälkeen jäljellä olevan etanolin poistamiseksi suurimmassa määrin.
Käyttöohjeet:
Viral RNA Isolation Kit -ohjekirja
